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  Expresión génica de cartílago articular conservado en diferentes condiciones y tratado con factores de crecimiento

  Revista Española de Cirugía Ortopédica y Traumatología 2007;51(6): 343-350

  

  ACOSTA C, IZAL I, RIPALDA P, FORRIOL F

  Revista Española de Cirugía Ortopédica y Traumatología 2007;51(6): 343-350

  Tipo artículo: Artículo

  Resumen del Autor: Objetivo. Analizar la expresión génica de factores anabólicos y catabólicos en cultivos de condrocitos obtenidos de cartílago, conservado a diferentes temperaturas, con distintos medios de conservación y tratados con diferentes factores de crecimiento. Material y método. Se cultivaron condrocitos de cartílago femoral distal de cordero joven conservado: a 4 ºC sin criopreservador; 4 ºC con PBS; 4 ºC con DMEM; -80 ºC sin criopreservador; -80 ºC con glicerol al 10%; y -80 ºC con DMSO al 10%. También se cultivó cartílago artrósico y viejo. Con las células cultivadas se efectuaron ensayos de RT-PCR con 10 ng de ARN por cada reacción y 20 nmoles de cada uno de los dos cebadores y fueron tratadas con diferentes factores de crecimiento (factor transformante de crecimiento β [TGF-β], factor de crecimiento fibroblástico [FGF-a], IGF-1, OP-1®). Las reacciones de RT-PCR fueron analizadas mediante electroforesis en geles de agarosa. Resultados. Los mejores resultados fueron en muestras cultivadas a 4 ºC con PBS; en el cartílago viejo disminuyó la expresión de todos los factores anabólicos, excepto el agrecano. El cartílago almacenado a -80 ºC con glicerol o DMSO expresó mayor cantidad de factores catabólicos. Al añadir los factores de crecimiento aumentó la expresión de TGF-β y se mantuvieron niveles de MMP-2 semejantes al grupo control. La mejor respuesta se obtuvo con OP-1®, FGF-a e IGF-1. Conclusión. El cartílago almacenado a -80 ºC expresa mayor cantidad de factores catabólicos que el cartílago conservado a 4 ºC. Objetivo. Analizar la expresión génica de factores anabólicos y catabólicos en cultivos de condrocitos obtenidos de cartílago, conservado a diferentes temperaturas, con distintos medios de conservación y tratados con diferentes factores de crecimiento. Material y método. Se cultivaron condrocitos de cartílago femoral distal de cordero joven conservado: a 4 ºC sin criopreservador; 4 ºC con PBS; 4 ºC con DMEM; -80 ºC sin criopreservador; -80 ºC con glicerol al 10%; y -80 ºC con DMSO al 10%. También se cultivó cartílago artrósico y viejo. Con las células cultivadas se efectuaron ensayos de RT-PCR con 10 ng de ARN por cada reacción y 20 nmoles de cada uno de los dos cebadores y fueron tratadas con diferentes factores de crecimiento (factor transformante de crecimiento β [TGF-β], factor de crecimiento fibroblástico [FGF-a], IGF-1, OP-1®). Las reacciones de RT-PCR fueron analizadas mediante electroforesis en geles de agarosa. Resultados. Los mejores resultados fueron en muestras cultivadas a 4 ºC con PBS; en el cartílago viejo disminuyó la expresión de todos los factores anabólicos, excepto el agrecano. El cartílago almacenado a -80 ºC con glicerol o DMSO expresó mayor cantidad de factores catabólicos. Al añadir los factores de crecimiento aumentó la expresión de TGF-β y se mantuvieron niveles de MMP-2 semejantes al grupo control. La mejor respuesta se obtuvo con OP-1®, FGF-a e IGF-1. Conclusión. El cartílago almacenado a -80 ºC expresa mayor cantidad de factores catabólicos que el cartílago conservado a 4 ºC. Traducir

  Notas:

   

  Palabras clave:

  ID MEDES: 38461

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